当初蹲在实验室操作台边上翻资料,脑子里反复卡着干细胞的寿命是多少天这个问题,问了好几个熟人,说法全对不上,有人说两三天,还有人张口就是几个月,听得人头疼。那段时间总想着找个准数,索性盯着一份体外培养的样本持续记录,还干了件蠢事,没按照规范更换培养液,想着省点麻烦,结果没过两天,培养瓶里面的细胞就大片飘起来,形态皱缩,完全失去活性,那时候才意识到,单纯问多少天根本没意义,环境一变,存活时间直接跟着变。
同一个来源的干细胞,放在营养充足、温度稳定的培养体系里面,维持正常增殖状态,能活几十天,还可以传代扩增;一旦培养液耗尽,代谢废物堆积,不用一周,大部分细胞就会凋亡。那回偷懒,隔了快三天才换液,瓶底贴壁生长的细胞慢慢脱落,显微镜下看,细胞膜变得破碎,原本饱满的形态塌下去,只残留一些碎片,当时还以为是细胞批次本身质量不行,反复核对记录,才确认是自己操作失误造成的。
体内和体外完全是两套标准。
移植进体内环境的干细胞,存活时间又不一样,不是固定天数。有的进去之后短短几天就被机体清除掉,也有一部分可以定植存活更久,这个和组织微环境、免疫反应都有关系,没法直接给一个统一数字。之前听一起做观测的人聊,他们跟踪的一组受试者,移植后的干细胞在体内能检出的时间跨度差别很大,短的三四天就很难检测到信号,长的可以持续几周,不存在一个固定的天数能概括所有情况。
网上很多随手甩出来的数字,大多只对应某一种特定细胞、特定培养条件,直接拿来套用肯定不行。造血干细胞、间充质干细胞,不同种类本身特性就不一样,就算同样放在培养箱,传代次数多了之后,细胞会慢慢衰老,分裂能力下降,存活周期也会缩短。早期没搞懂这点,看到一篇文献写某类干细胞存活14天,就默认所有干细胞都差不多是这个时长,拿着这个结论去对照手上的样本,结果观测数据完全对不上,白白浪费了一轮样本。
冷冻保存又是另外一回事。低温冻存状态下,细胞代谢几乎暂停,不算正常意义上的存活天数,复苏之后才会重新启动代谢。冻存几年的干细胞,复苏合格的话,依旧可以维持活性,但复苏操作要是出问题,细胞损伤严重,可能复苏之后短短一两天就全部死亡。
折腾好久才搞明白,不能脱离条件单独回答干细胞的寿命是多少天。体外理想培养,常见间充质干细胞,传代状态下可以维持数十天活性;营养缺失,几天内就大量死亡;进入人体之后,检出时间从几天到数周不等。
当时最不该做的,就是轻信网上一句孤立的数字,不去看它对应的实验条件,拿着片面信息硬套到自己的样本上,耗掉材料不说,还白白耽误了观测进度。
收拾培养台那天,把报废的培养瓶放进废液回收箱,关掉显微镜光源,没再继续纠结一个固定的天数。